人胚胎干细胞自分泌巨噬细胞迁移抑制因子及受体表达
原标题:人胚胎干细胞自分泌巨噬细胞迁移抑制因子及受体表达
摘要:文题释义:
胚胎干细胞:来源于囊胚期胚胎的内部细胞团,可以进行自我更新而其核型和功能保持不变,能够在体内和体外分化为任何体细胞系,由于这些特点,胚胎干细胞成为干细胞研究的重要模型,是建立哺乳动物早期发育、细胞替代治疗和组织再生体外模型的独特系统,并应用于药物开发。
巨噬细胞迁移抑制因子:是一种多功能细胞因子,由多种细胞类型产生,影响多种生物学过程,如增殖、迁移、凋亡和细胞周期进程。
背景:胚胎干细胞由于其自我更新和多向分化特性在帮助理解细胞发育以及再生医学、组织工程和细胞治疗方面潜力巨大,为能更加深入理解和有效运用人胚胎干细胞,探索发现影响人胚胎干细胞增殖存活的潜在分子是十分必要的。巨噬细胞迁移抑制因子在人类多种细胞中表达,起初认为主要参与炎症发生,但后来发现它在细胞增殖、分化、血管生成和肿瘤发生中发挥重要作用,但是人胚胎干细胞是否表达这种重要因子以及其在人胚胎干细胞中的功能仍不清楚。
目的:明确人胚胎干细胞是否表达巨噬细胞迁移抑制因子及其相关受体,确定何种受体与巨噬细胞迁移抑制因子相互作用,初步探索巨噬细胞迁移抑制因子对人胚胎干细胞增殖存活的影响。
方法:培养人胚胎干细胞,酶联免疫吸附实验检测细胞培养液中巨噬细胞迁移抑制因子水平,免疫荧光共聚焦显微镜观察巨噬细胞迁移抑制因子在细胞中的分布定位情况,细胞免疫荧光、免疫印迹方法检测胚胎干细胞中相关因子的表达;免疫荧光共聚焦显微镜、免疫共沉淀检测巨噬细胞迁移抑制因子与其受体的结合情况。分组干预:分别以巨噬细胞迁移抑制因子抑制剂ISO-1(0,12,24,48,96,192 μmol/L)干预处理人胚胎干细胞24 h,确定最佳抑制浓度,然后将不同质量浓度巨噬细胞迁移抑制因子(30,100,300 μg/L)与最佳抑制浓度ISO-1共孵育24 h。CCK-8法检测细胞增殖活性,TUNEL染色法检测细胞凋亡水平。
结果与结论:①巨噬细胞迁移抑制因子在人胚胎干细胞的胞质、胞膜、培养基中均有表达;②人胚胎干细胞表达巨噬细胞迁移抑制因子,主要表达其受体CXCR2和CXCR7;③巨噬细胞迁移抑制因子主要结合受体CXCR7;④巨噬细胞迁移抑制因子抑制剂ISO-1对细胞增殖存活的影响:与空白组相比,随着ISO-1浓度增大,细胞间隙明显增大,细胞活力逐渐降低(P < 0.000 1),TUNEL法检测细胞凋亡率明显增加(P < 0.000 1);⑤加入不同质量浓度的巨噬细胞迁移抑制因子(30,100,300 μg/L)后,能减弱ISO-1(192 μmol/L)诱导的细胞负相作用,细胞活性显著提高 (P < 0.05),细胞凋亡率明显降低(P < 0.01);⑥结果表明,人胚胎干细胞表达分泌巨噬细胞迁移抑制因子这一重要因子,在胞质、胞膜、细胞外均可以检测到,人胚胎干细胞主要表达巨噬细胞迁移抑制因子的受体CXCR2和CXCR7,而不是经典受体CD74,在人胚胎干细胞上与巨噬细胞迁移抑制因子互作的蛋白受体是CXCR7,没有发现与CXCR2相互作用的证据,其作用还需进一步研究。另外,研究发现巨噬细胞迁移抑制因子对维持人胚胎干细胞的增殖存活发挥重要作用。
缩略语:巨噬细胞迁移抑制因子:macrophage migration inhibitory factor,MIF
(魏艳召)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程
关键词: 胚胎干细胞, 干细胞, 因子, 巨噬细胞迁移抑制因子, 细胞增殖, 增殖
引用本文: 魏艳召, 郑晓晗, 高仕君, 黄 婷, 魏续芳, 陈薪旭, 赵振强. 人胚胎干细胞自分泌巨噬细胞迁移抑制因子及受体表达[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(1): 34-41.返回搜狐,查看更多
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