胚胎干细胞培养中的常见添加剂(一)
原标题:胚胎干细胞培养中的常见添加剂(一)
胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESCs,简称ES、EK或ESC细胞)是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的一类细胞,它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。
无论在体外还是体内环境,ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。胚胎干细胞体外培养的原则是:促进自身的同时,维持其未分化二倍体状态。
细胞培养离不开培养基的参与,胚胎干细胞的培养也不例外。在该过程中,往往需要添加一些额外成分,辅助干细胞的生长发育。
胚胎干细胞目前有两种主流培养方法:有饲养层培养法和无饲养层培养法。
无论哪种方法,都需要用到一些化学试剂、细胞因子这些成分有何作用?今天我们就来一探究竟。
丝裂霉素-C
对于有饲养层培养法,在制作“饲养单层”时,需要用丝裂霉素-C处理MEF细胞或STO细胞。其作用是使细胞停止分裂(灭活),但不至于失活,还能够分泌细胞因子,有利于后期干细胞生长。
明胶/基质胶
细胞与基底膜间的相互作用是调控细胞行为的重要因素之一。基质胶可认为是一种可溶性的基底膜基质。另外,有实验表明,这类凝胶状物质能够为干细胞提供一定的支撑力。
因此在对“灭活”过的MEF细胞或STO细胞进行铺板前,需要用明胶/基质胶包被培养瓶或者培养皿。
白血病抑制因子(LIF)
白血病抑制因子(Leukemia Inhibitory Factor,LIF),是一种具有多种功能的细胞因子,但其最重要的应用是维持胚胎干细胞的未分化状态。
也有实验表明,BRL条件培养基或者大鼠心肌细胞条件培养基,也有类似于LIF的功能。
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